Биохимия и молекулярная биология - Белясова Н.А. 2002

Метаболизм. Процессы, приводящие к запасанию энергии
Цикл трикарбоновых кислот
Окислительное декарбоксилирование пирувата

Продукты катаболизма углеводов, жирных кислот, аминокислот у большинства аэробных организмов (клеток) подвергаются полному окислению в цикле трикарбоновых кислот (иначе — цикл лимонной кислоты, цикл Кребса). В этой системе замкнутых реакций образуются СО₂, Н₂О, запасается небольшое количество энергии на уровне субстратного фосфорилирования и формируется большое количество восстановительных эквивалентов. Последние с помощью переносчиков попадают в дыхательную цепь и обусловливают там синтез АТР (окислительное фосфорилирование). Таким образом, основной задачей цикла трикарбоновых кислот (ЦТК) является окончательное окисление топливных молекул и улавливание восстановительных эквивалентов. Кроме этого, в ЦТК образуется ряд промежуточных продуктов, которые используются в качестве субстратов для биосинтеза важных соединений (аминокислот, порфиринов, глюкозы). Поэтому ЦТК рассматривают как промежуточный или центральный тип метаболизма — амфиболизм (от греческого «амфи» — оба), связывающий между собой реакции катаболизма и анаболизма.

Топливные молекулы вступают в ЦТК в виде активированного двууглеродного соединения — ацетил-СоА. В свою очередь, ацетил-СоА образуется при окислении жирных кислот, расщеплении некоторых аминокислот и в ходе окислительного декарбоксилирования пирувата.

Как показано ранее (глава 9), основным продуктом катаболизма углеводов является пируват. Это трехуглеродное соединение образуется также при окислении многих аминокислот. Для того чтобы пируват мог подвергнуться дальнейшему окислению в ЦТК, он должен быть превращен в ацетил-СоА. Этот весьма сложный процесс осуществляется с участием пируватдегидрогеназного комплекса, который включает три фермента и пять кофакторов. Суммарное уравнение процесса окислительного декарбоксилирования пирувата выглядит довольно просто (рис. 11.1), однако механизм действия всех компонентов пируватдегидрогеназного комплекса включает несколько стадий.

На первой стадии пируватдекарбоксилаза (называется также дегидрогеназой) с помощью своего кофактора — тиаминдифосфата катализирует декарбоксилирование пирувата с образованием оксиэтильного производного (—СНОН—СН₃), которое остается связанным с кофактором и ферментом. Затем происходит перенос оксиэтильного остатка на молекулу липоевой кислоты, которая служит кофактором второго фермента комплекса — липоат-ацетилтрансферазы. Перенос завершается окислением оксиэтильного остатка до ацетильной группы и частичным восстановлением липоевой кислоты. На третьей стадии ацетильная группа переносится от липоевой кислоты на тиоловую группу коэнзима А, в результате чего ацетил-СоА отделяется от комплекса и образуется полностью восстановленная форма липоевой кислоты — дигидролипоевая кислота. Последняя стадия процесса катализируется третьим ферментом —дигидролипоилдегидрогеназой, содержащей FAD в качестве простетической группы. Этот фермент катализирует окисление дигидролипоевой кислоты в липоевую с восстановлением FAD до FADH₂. Наконец, восстановительные эквиваленты от FADH₂ передаются на NAD⁺, который транспортирует их в дыхательную цепь.

Рис. 11.1. Суммарное уравнение процесса окислительного декарбоксилирования пирувата

Следует отметить, что в составе сформированного в процессе окислительного декарбоксилирования пирувата продукта — ацетил-СоА — появляется макроэргическая связь (обозначена волнистой линией на рис. 11.1).

Активность пируватдегидрогеназного комплекса зависит от количества АТР в клетке и регулируется с привлечением механизма ферментативной модификации белка: АТР-зависимая протеинкиназа осуществляет фосфорилирование определенных аминокислотных остатков в пируватдекарбоксилазной субъединице, в результате чего фермент утрачивает активность. Обратное действие (восстановление активности пируватдекарбоксилазы) совершает особая фосфатаза, которая дефосфорилирует белковую молекулу.