Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Современное состояние автоматического жидкофазного анализа аминокислотной последовательности
Введение

М. ЗИГЕЛЬМАН, Дж. Д. КАПРА (М. SIEGEL- MAN, J. D. CAPRA, Department of Microbiology, The University of Texas Health Science Centre at Dallas, 5323 Harry Hines Boulevard, Dallas, Texas 75235, U.S.A.)

Создание автоматического пептидно-белкового секвенатора [1], его последующие усовершенствования и использование оказали большое влияние на методологию определения структуры белков. Вклад автоматических методов в изучение структуры белков можно оценить по быстрому росту накопленных данных о структурах [4—8]. Назрела необходимость создания компьютерных систем хранения и выдачи данных для того, чтобы можно было полнее использовать опубликованные последовательности аминокислот (прим. ред. в конце главы).

Определение структуры белков сегодня оказывает гораздо большее влияние на решение биологических проблем, чем 15— 20 лет назад. Это обстоятельство объясняется необычайной эффективностью современных приборов и чувствительностью систем детекции, позволяющих исследователю определять полную структуру белка, располагая < 100 нмоль материала.

В этой главе рассматриваются некоторые методики, используемые в настоящее время в автоматическом ЖФ-анализе аминокислотной последовательности пептидов и белков. Рассматриваются правила эксплуатации прибора, методы подготовки образца и способы контроля состояния прибора. Помимо этого, обсуждаются вопросы использования носителей и основные проблемы автоматического определения последовательности. Опубликованы обширные обзоры по каждому из упомянутых вопросов [10, 14, 16].