Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Определение С-концевой последовательности аминокислот
Определение С-концевой последовательности
Другие химические методы расщепление

Предполагалось использование n-толуилкарбодиимида для получения ацилмочевины, при последующей обработке которой 0,01 М NaOH отщепляется N-толуилкарбонилтолуидид С-концевой аминокислоты [47]. Однако из-за того, что ацилмочевина гидролизуется с большим выходом, образуя исходный пептид, эта реакция не может быть положена в основу методики последовательного отщепления аминокислот.

Была сделана попытка применить метод селективного восстановления концевых аминокислот (разд. 18.3.3) для анализа N-ацил-2-оксазолидон, от которого в мягких условиях (0,3 М кислота, 1—2 ч) отщепляется 2-оксазолидон; при этом образуется укороченный пептид с новой С-концевой аминокислотой (рис. 18.12).

Предложены и другие методы последовательного С-концевого анализа [54, 61, 67]. Для С-концевого последовательного отщепления использовали алкоголиз оксазола (разд. 18.3.5) [68]. В этом случае еще предстоит преодолеть проблемы снижения выхода остаточных аминокислот из-за неполноты их отщепления и превращения нового карбоксильного производного (полученного при отщеплении С-концевого остатка) в сложный эфир, пригодный для последовательного отщепления. В настоящее время разрабатывается твердофазный вариант этого метода.