Основы биохимии Том 3 - А. Ленинджер 1985

Молекулярные механизмы передачи генетической информации
Еще о генах: репарация, мутации, рекомбинация и клонирование
Многие гены уже клонированы в различных клетках-хозяевах

С помощью методов, подобных описанным выше, в клетках Е. coli было проклонировано большое число разных генов. Во многих случаях новые гены экспрессировались в форме специфических белков или соответствующих мРНК. В одном из вариантов клонирования в нормальные клетки Е. coli были введены добавочные копии одного из генов Е. coli. В результате такие клетки синтезировали большое число дополнительных копий продукта этого гена. В другом варианте в клетках Е. coli были успешно проклонированы гены, выделенные из различных эукариотических организмов. Среди них можно назвать гены инсулина, гипофизарного гормона роста (соматотропина), a- и ß-глобинов, рРНК, соматостатина и овальбумина. Была осуществлена и обратная рекомбинация: бактериальные гены были введены в геном ряда эукариотических клеток. Например, ген ß-галактозидазы из Е. coli (разд. 29-23) был внедрен в растущие в культуре клетки мыши. Особенно интересный случай представляет введение гена Е. coli, кодирующего фермент гипоксантин-гуанинфосфорибозилтрансферазу (разд. 22.19), в культуру клеток соединительной ткани, взятой у людей с синдромом Леша-Найхана (разд. 22.19), при котором этот фермент генетически поврежден. Встроенный ген Е. coli экспрессировался с образованием бактериального фермента. Таким образом, генетический дефект клеток человека удалось исправить в лабораторных условиях с помощью введения соответствующего бактериального гена.

Эукариотические гены одних видов были также клонированы и экспрессировались в клетках других видов. Например, ген, кодирующий a-цепь гемоглобина кролика, был введен в растущие в культуре мышиные клетки и экспрессировался в них. Внедрение чужеродного гена в эукариотические клетки не всегда, однако, сопровождается его транскрипцией и трансляцией с образованием активного белка. Регуляция экспрессии генов у эукариот пока еще мало изучена (разд. 29.22); во время написания этой книги проводится большое число исследований по выяснению условий экспрессии рекомбинантных генов в эукариотических клетках.