Молекулярная биология. Практическое руководство - Великов В.А. 2013



Введение

Выделение общей ДНК из клеток

Выделение ДНК из бактерий

Выделение ДНК из лейкоцитов крови

Выделение ДНК из растительных тканей

Концентрирование ДНК путем осаждения спиртом

Спектрофотометрия препаратов ;ДНК, РНК и белков

Спектрофотометрическое определение концентрации ДНК

Определение концентрации белка по собственной флуоресценции

Электрофорез нуклеиновых кислот

Приготовление агарозного геля

Гель-электрофорез ДНК

Выделение плазмидной и фаговой ДНК

Минипрепаративное выделение плазмидной ДНК (минипреп)

Выделение плазмидной ДНК в больших объёмах (максипреп)

Выделение репликативной формы RF фага М13

Выделение одноцепочечной ДНК фага М13

Рестрикция ДНК

Рестрикция плазмидной и фаговой ДНК

Рестрикция геномной ДНК эукариот

ПЦР

Подбор праймеров

Проведение ПЦР-амплификации ДНК

Расчёт праймеров и параметров ПЦР с помощью специальных программ

Клонирование генов

Подготовка ДНК вектора и гена

Лигирование ДНК вектора и гена

Рестрикционное картирование вставки ДНК в плазмиде

Трансформация бактерий

Приготовление компетентных клеток E.coli

Трансформация E.coli

Подготовка электрокомпетентных клеток E.coli

Электропорация E.coli

Выделение рекомбинантного белка

Индуцированная экспрессия клонированных генов

Выделение белка из периплазмы клеток E. coli

Диализ препарата белка

Определение концентрации белка

Метод Бредфорда

Метод Лоури

Концентрирование белков путем осаждения ТХУ

Электрофорез белков

Приготовление растворов и заливка ПААГ

Проведение электрофореза белков

Окрашивание белков Coomassie R-250

Расчеты в работе с белками

Трансляция нуклеотидной последовательности

Предсказание нуклеотидной последовательности по аминокислотной

Анализ аминокислотной последовательности белка

Список рекомендуемой литературы

Приложение