Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Аналитические методы
Определение белка, присоединенного к твердому носителю
Определение аминогрупп на гидрофильных матрицах

Этот модифицированный вариант [4] метода [257] предназначен для гидрофил иных матриц, поскольку реакция идет только в водной среде.

Определенный объем геля, содержащий не более 4—5 мкмоль аминогруппы разбавляют водой до 9 мл 0,1 М К₂В₄О₇ и добавляют 1 мл 0,01 М тринитробензойной кислоты. Одновременно готовят раствор для сравнения из тех же объемов реагентов, но без геля. Позволяют гелю осесть или центрифугируют. I мл супернатанта разбавляют 5 мл 0,1 М К₂В₄О₇ и добавляют 0,5 мл 0,03 М глицина. В «глухом» опыте вместо раствора глицина добавляют 0,5 мл воды. После 25 мин стояния при 25 °С приливают 10 мл холодного метанола и измеряют поглощение при 340 нм.

Концентрацию аминогрупп на геле определяют по разности поглощения исследуемого образца и контрольного раствора (ε = 12400). Ошибка определения <10%.