Биохимия - Химические реакции в живой клетке Том 3 - Д. Мецлер 1980
Биохимическая генетика и синтез нуклеиновых кислот и белков
Рекомбинация, интеграция и исключение
Обратная транскриптаза
Необычайный интерес в последние годы вызвали РНК-содержащие онкогенные вирусы. Большинство исследователей, занимающиеся биохимической генетикой и функциями нуклеиновых кислот, считали, что ДНК образуется только за счет репликации других молекул ДНК. Если транскрибирование РНК с ДНК может протекать свободно, то обратный процесс, а именно образование ДНК на РНК-матрице, считался маловероятным. Большой неожиданностью поэтому оказалось обнаружение во многих онкогенных РНК-содержащих вирусах, и в том числе в вирусах, вызывающих у животных лейкоз, РНК-зависимой ДНК-полимеразы (т. е. обратной транскриптазы). Этот фермент обнаруживается в зрелых вирусных частицах. Наиболее тщательно очищенный фермент вирусов миелобластоза птиц состоит из двух белковых субъединиц, имеющих мол. вес 110 000 и 70 000, и содержит два атома связанного Zn2+. Для функционирования фермента необходима короткая затравка и матричная цепь РHК. При этом сначала получается гибрид ДНК — РНК, из которого затем (вероятно, после гидролитического расщепления цепи РНК под действием РНКазы Н, разд. Д, 5, в) получается двухцепочечная ДНК. Таким образом, заражение РНК-содержащими вирусам сопровождается образованием ДНК, которая дальше может служить матрицей для образования других вирусных частиц. ДНК может включаться в ДНК клетки-хозяина, что может служить причиной появления опухолей ([236—240].
Способность обратной транскриптазы копировать молекулы РНК имела важное значение для получения цепей ДНК с теми же последовательностями, что и уникальные молекулы РНК (например, мРНК, синтезируемая в высокоспециализированных клетках типа предшественников эритроцитов, в которых образуется только один гемоглобин). Полученные таким способом ДНК-копии (иногда их называют кДНК) могут быть использованы в самых различных биохимических исследованиях. При соответствующих условиях ДНК-полимераза I также может точно копировать последовательность РНК [241].