Анатомія рослин - 2013

Розділ 1. ТЕХНІКА ВИГОТОВЛЕННЯ МІКРОПРЕПАРАТІВ

Розрізняють препарати тимчасові, які знищуються після розгляду і постійні, які зберігаються невизначено довгий час.

Для виготовлення мікропрепаратів необхідно мати інструменти, допоміжний матеріал, реактиви, зробити серію зрізів рослинних об’єктів і помістити їх у включаючу рідину.

Використовують предметне і покривне скло, гостру бритву, леза, препарувальну голку, скальпель, пінцет, м’яку ганчірку для протирання скла, фільтрувальний папір.

1.1. Приготування зрізів

При детальному вивченні циліндричних органів зрізи роблять в трьох напрямках: поперечному, повздовжньому радіальному і повздовжньому тангентальному.

З листків можна приготувати зрізи двох видів: перпендикулярні до площини (поперечні) і паралельні до площини (площинні).

Зрізи роблять за допомогою бритви або леза, дотримуючись наступної послідовності дій:

- Затиснути об’єкт між великим і вказівним пальцями лівої руки, великий палець при цьому нижче рівня зрізу на 5-10 мм;

- Скальпелем чи гострим ножем вирівняти поверхню об’єкту;

- При строго вертикальному положенні об’ єкту горизонтально затиснути між великим і вказівним пальцями правої руки лезом, ведучи його до себе навскоси, одним плавним швидким рухом зробити тонкий зріз; не слід робити коротких рухів, при яких отримують нерівні зрізи; лезо і об’єкт рекомендуються постійно змочувати водою;

- Зробити зразу декілька зрізів;

- Зняти зрізи з леза препарувальною голкою, перенести на предметне скло в краплю включаючої рідини;

- Розглянути зрізи під мікроскопом при малому збільшенні (м/з) і вибрати найбільш вдалі;

- Для отримання контрасту між біологічними структурами клітини тканин зрізи забарвлюють різними барвниками.

З тонких ніжних органів (листя, молоді корінці), а також з дрібних об’єктів (насіння), які важко втримати в руці, зрізи роблять помістивши рослинний об’ єкт в серцевину бузини, корка, шматочка бульби картоплі або моркви, діаметром близько 1 см.

Для цього серцевину бузини розрізають навпіл гострим ножем або скальпелем, об’єкт поміщають і затискують між двома відрізками, вирівнюють поверхню і лезом роблять зріз через серцевину бузини разом з об’єктом.

Зрізи або інші досліджувані об’єкти поміщають на предметне скло в краплю включаючої рідини і накривають покривним склом. Покривне скло беруть двома пальцями за ребра і під гострим кутом підводять нижній край до краю краплі рідини, потім плавно, притримуючи голкою опускають, надлишок

рідини, який виходить за межі покривного скла, видаляють фільтрувальним папером, а нестачу поповнюють, поміщаючи додаткову краплю на межу покривного і предметного скла.

Якщо пухирці повітря попадають під покривне скло краще всього підняти його голкою і знову опустити.

Покривне скло зверху обов’язково повинно залишатися сухим і щільно прилягати до предметного скла.

При виготовленні препаратів необхідно дотримуватися певних умов. Предметне і покривне скло повинні бути чистими і сухими. Для запобігання забрудненням слідами жиру не слід торкатися поверхні покривного скла пальцем, а брати його пінцетом за середину краю, або вказівним і великим пальцем за ребра. Поводитися дуже обережно, так як скло дуже тонке і легко ламається.

Рис. 2. Техніка виготовлення зрізів

Рис. 4. Техніка роботи з мікроскопом