Практическая химия белка - А. Дарбре 1989

Дисульфидные связи
Расщепление полипептидной цепи до коротких цистинсодержащих пептидов
Гидролиз термолизином

При определении положения дисульфидных связей в а-лактальбумине [45] и 2,5 S мышином ростовом факторе нервной ткани [2] цистинсодержащие пептиды получали гидролизом пептических фрагментов термолизином. В случае а-лактальбумина гидролиз проводили при 37 °С в 0,0025 м СаСl₂ при pH 7,5. pH устанавливали постепенным добавлением 1 М триса, реакцию останавливали путем подкисления реакционной смеси до pH 3,1 с помощью НСl. Пептиды ростового фактора растворяли в воде и инкубировали с термолизином в течение 22 ч, поддерживая pH 7,0 с помощью автотитратора. Высокий выход цистинсодержащих пептидов свидетельствовал об отсутствии дисульфидного обмена [45]. Гидролиз термолизином проводят также при pH 6,5 и 6,9 [5, 30]. См. также разд. 3.6.2.