Химия белка. Структура, свойства, методы исследования - Шендрик А.Н. 2022

Методы экспериментального исследования структуры белков
Масс-спектрометрия электронного удара
Введение в пептид дейтериевой метки

Для повышения надежности определения аминокислотной последовательности пептида в него вводят дейтериевые метки. Для получения дейтеропроизводных пептидов используют D₆-уксусный ангидрид или D₃-метилиодид вместо обычных реагентов ацетилирования и метилирования. Рассмотрим практические последствия такой модификации. Например, ион с m/z=126 в спектре обычного перметилированного ацетилпептида может принадлежать остатку N-концевой пирролидонкарбоновой кислоты, остатку аспарагина (в результате разрыва N-С связи) или N-концевому остатку серина, который выбросил молекулу этанола. Анализ D-меченного аналога пептида позволяет однозначно решить эту задачу. Если модифицировать пептид немеченным метилиодидом и D₆-уксусным ангидридом, то в первых двух случаях масса иона останется прежней, а в третьем - масса иона с m/z=126 увеличится до 129. Если же использовать D₃-метилиодид и немеченный уксусный ангидрид, то в первых двух случаях образуются ионы с m/z = 129, а в третьем с m/z=132.